Estudio con ecografia de alta frecuencia de tendinopatias en deportistas y evolución tras suplementación con TENDOACTIVE
Dra. Ingrid Möller Parera, Sra. Carmen Moragues Pastor
Instituto Poal de Reumatología. Barcelona. Año 2004
En el presente estudio se evalúa, mediante ecografía de alta resolución, la respuesta al tratamiento con el complemento alimenticio TENDOACTIVE en deportistas con lesiones tendinosas.
DATOS DEL ESTUDIO
Nº deportistas: 30
Se ha incluido en el estudio 30 deportistas menores de 35 años, 19 varones y 11 mujeres de edad media 25,5 años y una actividad deportiva mínima de 8 horas semanales.
Diagnósticos
Presentaban diferentes lesiones de partes blandas:
5 tendinosis del supraespinoso
2 bursitis subacromiodeltoideas
3 tenosinovitis bicipitales
5 tendinosis cuadricipitales
13 tendinosis rotulianas proximales o distales
2 tendinosis o bursitis anserinas
2 tendinosis aquileas
1 lesión muscular
Duración del estudio: 3 meses
Fecha y lugar donde se desarrolló el estudio: Año 2004 / Instituto Poal de Reumatología de Barcelona (España)
MÉTODO
Introducción:
Las lesiones tendinosas en la práctica deportiva son muy frecuentes y requieren tratamiento. El motivo de consulta habitual es el dolor con o sin impotencia funcional (movimiento) asociada.
La medición del dolor se realiza habitualmente mediante escalas analógicas visuales (EAV).
La ecografía es un estudio de imagen que permite identificar lesiones en partes blandas, como lo es el tendón, y realizar un seguimiento evolutivo. En determinadas lesiones, la actividad antiinflamatoria produce un incremento de vascularización local, la cual se pude cuantificar mediante el uso de Power Doppler.
Método de estudio:
A todos ellos se les realizó una historia clínica, valoración del dolor mediante escala analógica visual (EAV) y estudio ecográfico basal, intermedio y a los 3 meses de tratamiento.
Como medicación se administraron AINE's (antiinflamatorios no esteroideos) 15 días, complementándolo con TENDOACTIVE 3 cápsulas al día durante 3 meses.
Se recomendó en todos los casos las medidas ergonómicas adecuadas.
Resultados
Respecto a la medición del dolor mediante escala analógica visual (EAV), partiendo de un EVA basal (inicial) de 54,5 de media, se obtuvo un EAV a los 3 meses de 9,66 de media, lo que equivalía a una reducción media del 44,8%.
En la medición del Power Doppler, ausente en 2 lesionados, leve en 9, moderado en 4 e intenso en 5 al inicio del tratamiento, se obtuvo en todos los casos al final del tratamiento un Power Doppler ausente.
CASO 7 - Varón 30 años
- Ciclismo de montaña 10 h/sem. + natación 3 h/sem.
- Gonalgia de 3 meses de evolución
EAV (valoración grado dolor): 50
ECOGRAFIA: Tendinosis cuadricipital D
SEÑAL DOPPLER: Intensa
La señal Doppler indica que hay inflamación en la zona | 
EAV (valoración grado dolor): 0
ECOGRAFÍA: Tendón cuadricipital sin alteraciones con entesofito incipiente.
SEÑAL DOPPLER: Negativa
No hay inflamación en la zona afectada. |
CONCLUSIONES
Para el tratamiento de las lesiones agudas de partes blandas se requiere medicación analgésica/antiinflamatoria además de reposo funcional y medidas ergonómicas adecuadas y rehabilitación en ciertos casos.
TENDOACTIVE es un complemento nutricional compuesto por Colágeno tipo I, Mucopolisacáridos, ambos componentes naturales de la matriz extracelular del tendón y vitamina C, que ayuda a estimular la síntesis del colágeno.
A través del estudio vemos que el empleo de TENDOACTIVE en las lesiones tendinosas puede contribuir al proceso de recuperación de las mismas acortando el periodo de convalecencia.
Estudio 2
Estudio in vitro sobre tendinopatias en humanos
Informe sobre el ensayo de adhesión y proliferación, microscopia electrónica, inmunofluorescencia y análisis de inmunotransferencia (Western Blot)con compuestos de Bioiberica
1. Prof. Mehdi Shakibaei / Constanze Csaki
2. Ali Mobasheri
1 Grupo de investigación osteomuscular, Instituto de anatomía, Universidad Ludwig Maximilian de Múnich, Pettenkoferstrasse 11, 80336 Múnich, Alemania.
2 Departamento de veterinaria, Universidad de Nottingham, Campus Sutton Bonington, LE12 5RD, Reino Unido.
INTRODUCCIÓN
Numerosos estudios han confirmado que los huesos y las partes blandas tales como ligamentos y tendones, especialmente en personas adultas, presentan una capacidad limitada de auto-reparación.
Los tendones son estructuras anatómicas que unen músculos a huesos. Tienen estructura cilíndrica, elongada, formada de tejido conjuntivo denso y adaptadas a la tensión en una dirección, con fibras de colágeno paralelas (principalmente colágeno tipo I). La reducida vascularización de dichos tejidos es una de las causas de la lenta curación de tendones y ligamentos.
Las células predominantes en los tendones se llaman tenocitos. Los tenocitos tienen la función de mantener la estructura de la matriz a través de procesos de degradación y síntesis. Sin embargo, el tendón tiene una densidad relativamente baja de células y con poca actividad mitótica, lo cual explica la reducida tasa de recambio de este tejido y cuestiona el grado en que estas células pueden promover la curación intrínseca.
Las lesiones de tendón son las lesiones ortopédicas más comunes. Por ejemplo, al menos 100.000 lesiones de Tendón de Aquiles son diagnosticadas y tratadas anualmente en USA (A. Praemer et al., “Musculoskeletal condition in the United States”, 1st ed. American Academy of Orthopaedic Surgeons, Park Ridge, IL, 1992).
Los daños en tendones son causados por diversos factores, entre los que se incluyen lesiones por la práctica de deportes o accidentes, distensiones, posturas incorrectas, infecciones bacterianas, reacciones medicamentosas, artritis en una articulación, y como consecuencia de diversas enfermedades.
La curación por debajo del nivel óptimo, el largo período de rehabilitación y una elevada incidencia de recaída hacen que las lesiones de tendones sean difíciles de tratar adecuadamente.
Un estudio in vitro con tenocitos humanos, llevado a cabo en la Universidad Ludwig Maximilian de Múnich (Alemania), nos permite afirmar que el Complemento Nutricional TENDOACTIVE actúa aumentando la proliferación de los tenocitos, células responsables de la producción de matriz extracelular y por tanto de los proteoglicanos y del colágeno tipo I. En dicho ensayo se uso un factor de crecimiento como control positivo y se analizó el comportamiento de los tenocitos durante 10 dias.
Por todo ello, podríamos concluir que TENDOACTIVE acelera el proceso de recuperación mejorando la regeneración de los tenocitos.
OBJETIVO
Evaluar el potencial efecto de TENDOACTIVE sobre la curación, regeneración y reparación de tendón humano in vitro.
Diseño experimental
Fecha realización: Abril 2006-Febrero 2007
Dosis: 225, 1110, 1660 ug/mL
Control Positivo: IGF-1, 10 ng/mL
Tipo cultivo: Tendocitos humanos in vitro.
Ensayos realizados:
1) Evaluación de la adhesión y proliferación - CONTROL: Medio de cultivo completo serum free.
- MÉTODO:
Explantes de tendón humano (sobre 3-5 mm) fueron cultivados en un frasco con medio de cultivo. Después de 1-2 semanas, los tenocitos empezaron a migrar desde el tejido tendinoso, adheriéndose al frasco de cultivo y formando una monocapa. Esta monocapa se pasó cierto número de veces hasta ganar suficiente densidad de tenocitos.
Se sembraron las placas con 15000 tenocitos por pocillo y a continuación se incubaron con TENDOACTIVE durante 10 días.
Para el ensayo de adhesión y proliferación se hizo un recuento manual de los tenocitos.
REPETICIONES: 3 concentraciones, 2 pacientes (un experimento realizado en Munich y otro en Berlín) y por triplicado.
2) Evaluación por microscopia electronica de transmisión
Se prepararon placas de Petri con 100000 tenocitos y se incubaron con medio de cultivo hasta confluencia. Se incubaron las células con el compuesto durante 1 hora y a continuación se procedió a la preparación de la muestra para microscopía electrónica. Mediante esta técnica se evaluó el estado de salud (apoptosis, etc) de las células al ser tratadas con los compuestos.
3) Evaluación de la expresión de colágeno tipo i y Β1-integrinas.
El experimento se realizó en cultivos monocapa en Chamber SlidesTM (Nunc), con 5000 tenocitos por pozo. El revelado se hizo con anticuerpos para Colágeno Tipo I (Chemicon, PAB) y Β1-integrina (Sigma, MAB) y a continuación se examinaron los cultivos con microscopio de fluorescencia (Leica). Debe destacarse que dicha evaluación se realizó después de haber tratado los cultivos durante 1 hora con TENDOACTIVE.
4) Cuantificación colageno tipo i.
Después de separar el colágeno tipo I del medio de cultivo se procedió a una hidrólisis controlada del mismo mediante enzimas, las fracciones se separaron mediante cromatografía en gel y después de teñir las bandas se cuantificaron por densitometría.
RESULTADOS
1) Adhesión y proliferación
En los Cultivos Control incubados exclusivamente con medio de cultivo completo serum free la cantidad de células se mantuvo constante con una ligera reducción del número de células después de 59-75 horas. Dado que las células del tendón crecen lentamente in vitro, un número constante de células era esperado en los controles. En los Controles Positivos (IGF-1)* se observó un incremento robusto del número de células con un pico entre las 51-55 horas; esta proliferación fue constante hasta que empezó una fase de ligero decrecimiento en el número de células hacia las 72 horas. Este incremento en número de células era de esperar ya que el IGF-1 tiene efecto estimulatorio de la proliferación.
La reducción ligera del número de células en ambos cultivos se debe probablemente a la reducción en la concentración de nutrientes el medio después de un tiempo relativamente largo de incubación.
TENDOACTIVE ejerció un efecto estimulatorio potente en las células. La concentración (1660 ug/mL) fue más eficaz que las dos concentraciones restantes.
El incremento de proliferación fue menor en los Cultivos Control incubados sólo con medio de cultivo completo serum free. Este efecto se observa principalmente al final del ensayo días 8, 9 y 10.
*factor de crecimiento.
Control Positivo
Efectos del control vs TENDOACTIVE (1660 µg/ml) en la adhesion y proliferación de tenocitos humanos in vitro
Efectos del control vs TENDOACTIVE (1110 µg/ml) en la adhesion y proliferación de tenocitos humanos in vitro
Efectos del control vs TENDOACTIVE (225 µg/ml) en la adhesion y proliferación de tenocitos humanos in vitro
2) Microscopía electrónica de transmisión
Mediante esta técnica se ha evaluado la viabilidad celular, apoptosis, ... de los tenocitos al ser tratados con TENDOACTIVE: - No se han observado signos de toxicidad, ni apoptosis ni necrosis celular.
- Se ha observado gran cantidad de retículo endoplasmático que es signo de síntesis proteica.
- Ej. De colágeno tipo I. También se observa matriz extracelular que ha sido secretada por los tenocitos.
3) Inmunofluorescencia
3.1. COLÁGENO TIPO I.
La microscopia de inmunofluorescencia es una técnica inmunohistoquímica que consiste en conjugar colorantes fluorescentes (isotiocianato de fluoresceína, rodamina B de lisamina o ácido 1-dimetilaminonaftalen-5-sulfónico) con anticuerpos o antígenos, exponiendo después este conjugado a los anticuerpos o antígenos correspondientes en cortes de tejidos, frotis de microorganismos o de células, o cultivo de tejidos en capa única. Cuando la reacción es positiva y se expone a la luz ultravioleta se producirá fluorescencia observable bajo el microscopio de inmunofluorescencia.
3.2. Β1-INTEGRINAS
4) Cuantificación colageno tipo i
CONCLUSIONES
TENDOACTIVE ejerce un potente efecto estimulatorio de la proliferación celular, es decir, tiene un efecto anabólico sobre los tenocitos. Al mismo tiempo, mediante TEM (*) se ha observado que las células se mantienen viables y que presentan gran cantidad de retículo endoplasmático necesario para la síntesis de matriz extracelular (colágeno, etc).
Por Inmunofluorescencia se ha confirmado que los tenocitos al ser tratados con TENDOACTIVE mantienen la expresión de colágeno tipo I y de Β1-Integrinas.
El colágeno tipo I es típico del tendón y responsable de su resistencia a la tensión. Los tendones sanos tienen mayoritariamente colágeno tipo I, con pequeñas cantidades de colágeno tipo III. No obstante, ante un problema de tendinosis parte del colágeno se pierde y se repara la estructura sintetizando colágeno tipo III (arquitectura del tendón no íntegra). Por tanto, es interesante que en el proceso de regeneración este colágeno tipo III vaya siendo substituido por colágeno tipo I.
Las Β1-integrinas son receptores de membrana que permiten a las células unirse y responder a la matriz extracelular (adhesión). Por tanto, son necesarias para mantener las propiedades de proliferación, diferenciación y supervivencia de los tenocitos.
Estos resultados sugieren que TENDOACTIVE podría ser útil para la prevención y/o tratamiento de tendinopatías (tendinitis, tendinosis, etc). Se cree que una aplicación exógena de dicho producto podría contribuir a la remodelación del tendón, necesaria para devolverlo a su estructura funcional madura.
*TEM: microscopia electrónica de transmisión
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